Иммунохроматографиялық талдау

Иммунохроматографический талдау
Қазіргі заманғы медициналық практикада жыл сайын өсіп рөлі зертханалық диагностиканың негізгі құралы ретінде диагноз қою және мониторинг терапия. Бірі-қарқынды дамып келе жатқан және қажетті зертханалық диагностикасы әдістерінің болып табылады иммунохроматографический талдау.

ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ (ИХА) — бұл әдіс бар-жоғын анықтау белгілі бір шоғырлануы заттардың биологиялық материалдарда (зәр, жаңа алынған қан сарысуы немесе плазма, қан, сілекей, нәжіс және т. б.). Талдаудың осы түрі жүзеге асырылады индикаторлық шайқағыштар көмегімен, таяқшалар, панельдер немесе тест-кассета қамтамасыз ететін жылдамдық тестілеу өткізу. ИХА — салыстырмалы жас талдау әдісі, ол жиі белгіленеді әдебиетте сондай-ақ, әдісі ретінде құрғақ иммунохимии, стрип-тест, QuikStrip cassette, QuikStrip dipstick, экспресс-тест немесе экспресс-талдау. Осы атауларға байланысты мүмкіндігіне орай жылдам өткізу әдісін талдау.

Жұмыс істеу принципі иммунохроматографиялық тест мынада батыру кезінде қамыр физиологиялық сұйықтық, ол бастайды мигрировать бойымен жолақ қағидаты бойынша қабатты хромотография. Жылжымалы фаза болып табылады физиологиялық сұйықтық. Бірге сұйықтықпен движутся және антиденелер с бояғышпен. Егер осы сұйықтық бар зерттелетін антиген (гормон, инфекциялық немесе онкологиялық маркер), онда оны байлау, бірінші және екінші типті антиденелер болып табылады, қазірдің өзінде иммунологиялық әдіспен талдау. Бұл антиденелердің жинақталуы бастап бояғышпен айналасында антиденелердің, қатаң иммобилизацияланған тест-аймағына ИХА-жолақтар, ол түрінде көрінеді ағарған, қара жолақтар. Несвязавшиеся антиденелер с бояғышпен мигрируют бұдан әрі бойымен жолақ және сөзсіз өзара іс-қимыл жасайды күннен кейінгі антиденелермен бақылау аймағында, және байқалады, екінші қара жолағы. Өзара іс-қимыл (және қара жолағы) бақылау аймағында болуы тиіс көрініс табуы әрқашан (егер талдау дұрыс) қатысуына қарамастан зерттелетін антигенін в) физиологиялық сұйықтық (суретті қараңыз).1). Нәтижелері визуалды анықталады немесе компьютерлік өңдеу, сканерленген сурет.

Иммунологиялық талдау әдісі негізделген реакция арасындағы антигенмен және тиісті оған антителом. Антиген — бұл зат чужеродное адам ағзасы үшін және мүмкін іске қосу иммундық жүйеге (қорғаныш реакциясын). Антиденелер — бұл белоктар, бөлінеді жасушалары ағзаның енгізу кезінде оған антигенін. Әдісі имунной хроматография негізделген особенном қасиетінде антиденелердің антигенмен байланысуға тән (яғни сайлау). Бұл дегеніміз, әрбір антидене біледі және байланысады, тек белгілі бір антигенмен. Осы бірегей ерекшеліктері антиденелердің және негізделген барлық иммунологиялық талдау әдістері, оның ішінде ИХА. Оның үстіне айқындайтын «антигенмен» осы әдісі, талдау бола алады және айқындалатын биоматериале антидене — инфекциялық агентке немесе аутоантитело, сонда қалған пайдаланылатын тест антиденелер болады антиантителами. «ИХА — тестілер пайдаланылады үш типті антиденелер.

Еритін моноклондық антиденелер зерттелетін антигену немесе антителу, конъюгированные («тігілген») коллоидным алтын — бояғышпен, оңай, тіпті ең шағын шоғырлануы. Бұл антиденелер жазылуы учаскесінің жанында батыру тест-жолақты физиологиялық сұйықтық (зәр, қан).
Поликлональные антиденелер зерттелетін антигену немесе антителу, қатаң иммобилизацияланған тест-аймағындағы жолақтар.
Екіншілік антиденелер моноклональным антителам, қатаң иммобилизацияланған бақылау аймағында тест-жолақтар.
Жұмыс істеу принципі, тест есірткіні бірнеше ерекшеленеді тест-жүйелер. Құрылғы ИХА-жолақтар ерекшеленеді тест-аймағына иммобилизованы жасанды антигендер қабілетті арнайы байланысуға бос антиденелермен. Егер зерттелетін антиген (наркотик) қатысады физиологиялық сұйықтық учаскелері байланыстыру антиденелердің (эпитопы) бос қалады, және олар қабілетті байланысуға жасанды антигенами тест-аймағына құра отырып, қараңғы жолағын есебінен конъюгированного бояғыш. Егер зерттелетін антиген присутстствует сұйықтықтың болса, онда антиденелер хабарласа отырып, олар емес, өзара мүмкін антигенами тест-аймақта білім және қараңғы жолақтар онда болмайды. Бірақ екі жағдайда да (егер талдау дұрыс) жүреді байлау «боялған» антиденелердің күннен кейінгі антиденелермен бақылау аймағында және білім беру, онда қараңғы жолақтар. Ықтимал нұсқаларын талдау жүргізу кезінде: бір жолақ — оң нәтиже, екі жолақ — теріс нәтиже жоқ жолақтарын — талдау дұрыс емес.

Пайдаланудың негізгі артықшылықтары иммунохроматографических тест жолақтар болып табылады:

Қарапайымдылық және қолайлылық — алуға мүмкіндік береді нәтижесі (талдау және бастапқы ұсыну туралы ауру салдарынан немесе) жабдық және арнайы дағды
Сенімділік — сенімділік тест жетеді, 92-99,8%, бұл ретте әрбір тест бар кірістірілген ішкі бақылау
Үнемділік — аз шығындар сатып алу үшін тест және уақытты үнемдеу зерттеу жүргізу. Жекеше құны бір ИФА-зерттеу 5-10 есе қымбат ИХА алу нәтижесін кем дегенде келесі күні
Жасырын — бұл әсіресе маңызды аурулар анықталған кезде жыныстық жолмен берілетін басқа да жұқпалы аурулар, сондай-ақ анықталған есірткі заттар
Тәуелсіздік — талап етпейді алдын ала медициналық консультациялар және рецепт дәрігер
Бола отырып, тиімді құралы диагностикалау, экспресс-тестілер мүмкіндік береді көзбен бірнеше минут ішінде бағалап және анықтау мазмұны антигендерді, антиденелерді, гормондардың және басқа да диагностикалық маңызды заттардың адам ағзасында. Экспресс-тесттер ерекшеленеді дәрежесі жоғары сезімталдық, дәлдік, обнаруживая 100-ден астам аурулардың түрлерін қамтитын мұндай көп таралған аурулары туберкулез, мерез, гонорея, хламидиоз, түрлі вирустық гепатит, және т. б., сондай-ақ бүкіл гаммасын қолданылатын есірткі заттардың жоғары дұрыстығын анықтау. Маңызды артықшылығы осы түрін тест болып табылады оларды қолдану диагностикалау in vitro талап етпейтін тікелей қатысуын зерттелетін науқастың.

Алайда иммунохроматографические тест-жолақтар емес, кемшіліктерді айырылған. Онда ол сенімділік, сезімталдық және үнемділігін тест. Сенімділігі мен сезімталдығы, байланысты, біріншіден, сапасы пайдаланылатын тест моноклонды антиденелерді және, екіншіден, концентрациясы антигенін в биоматериале. Сапасы моноклоналды антиденелер тәуелді тәсілдерін, оларды алу, тазалау және тіркеу » болып табылады. Концентрациясы антигенін – аурудың сатысына санын биоматериалды. Саны биоматериалды әсіресе маңызды пайдалану кезінде алынған қан. Бұл ретте елеулі роль атқарады гематокрит, т. е. қатынасы плазма және нысанды элементтер. Жоғары гематокрите саны азаяды плазма антигенмен мигрирующей бойымен жолақтар. Температурасы, байланысты жылдамдығы өзара іс-қимыл антиденелер антигенмен, маңызды тек уақыт қойылған тест. Бұл пайдалануға жолақ төмен температурада судың қату нүктесінен құрайтын негізгі бөлігін биоматериалды, мағынасы жоқ.

Күмән туғызады үнемді пайдалану экспресс-тест бюджеттік медициналық ұйымдарда шұғылданатын бұқаралық халықты диспансеризациялау және олар рет-онда қолайлы және қажетті кешенді стрип-жүйесі үшін тест-жолақты скринингтік анықтау, әр түрлі аурулар. Бұл төмен құны бойынша талдау бюджеттік тиіс. Бұл ретте, өзіндік тест-жолақтар кейбір жағдайларда 10 есе асып түседі төлеуді талдау.